VISUALISATION PAR LE SYSTEME GAL4/UAS DU TRANSPORT DES NANOPARTICULES DE POLY(ACIDE LACTIQUE) CHEZ LA DROSOPHILE

Résumé : Les nanoparticules biorésorbables sont des candidats prometteurs pour la nanomédecine et en particulier la vaccination, de par leur taille proche de celle d’un virus et leur nature biodégradable. Si on adsorbe à la surface des NPs un antigène, les cellules de l’immunité vont prendre en charge les particules formulées et vont pouvoir initier une réponse immunitaire. Notre équipe travaille sur l’élaboration de candidats vaccins particulaires, utilisant comme adjuvant des nanoparticules d’acide poly-lactique. Les premières études de biodistribution ont montré que les cellules M, situées au niveau des plaques de Peyer (chez la souris), permettent le passage des nanoparticules de la lumière intestinale à la muqueuse intestinale. Nous souhaitons élargir cette étude en analysant leur distribution dans le reste de l’organisme afin de mieux comprendre leur prise en charge et tenter de l’améliorer à l’aide de molécules immunostimulatrices appropriées. Cette étude repose sur les propriétés du système GAL4/UAS qui se traduit par l’expression de la protéine fluorescente GFP lorsque la protéine Gal4 se fixe sur le promoteur UAS. La protéine Gal4 a été réduite au maximum afin d’él iminer toute association et réaction aspécifique. Ainsi la protéine gal4min a été produite chez la bactérie BL21 (De3). Après validation de la construction et de la fonctionnalité de la protéine recombinante, celle-ci a été adsorbée sur des nanoparticules fluorescentes (Fluorophore Bodipy CellTrace). Des larves UAS-GFP, au stade 1 ont été nourries avec ces formulations PLA-gal4min. Au Stade 3, il est possible de visualiser des cellules GFP positives au niveau de la muqueuse intestinale. Ces observations valident ainsi le concept selon lequel les NPs PLA-gal4min pourraient permettre de suivre la biodistribution des NPs chez la Drosophile. Ce concept pouvant par la suite être étendu à d’autres modèles.
Type de document :
Mémoire de diplôme
Biochimie, Biologie Moléculaire. 2011
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Contributeur : Samuel Haroutunian <>
Soumis le : mardi 28 février 2017 - 12:41:20
Dernière modification le : jeudi 8 février 2018 - 11:10:17
Document(s) archivé(s) le : lundi 29 mai 2017 - 13:44:50

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Sophie Legaz. VISUALISATION PAR LE SYSTEME GAL4/UAS DU TRANSPORT DES NANOPARTICULES DE POLY(ACIDE LACTIQUE) CHEZ LA DROSOPHILE. Biochimie, Biologie Moléculaire. 2011. 〈hal-01478760〉

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