VISUALISATION PAR LE SYSTEME GAL4/UAS DU TRANSPORT DES NANOPARTICULES DE POLY(ACIDE LACTIQUE) CHEZ LA DROSOPHILE
Résumé
Les nanoparticules biorésorbables sont des candidats prometteurs pour la nanomédecine et
en particulier la vaccination, de par leur taille proche de celle d’un virus et leur nature
biodégradable. Si on adsorbe à la surface des NPs un antigène, les cellules de l’immunité
vont prendre en charge les particules formulées et vont pouvoir initier une réponse
immunitaire.
Notre équipe travaille sur l’élaboration de candidats vaccins particulaires, utilisant comme
adjuvant des nanoparticules d’acide poly-lactique.
Les premières études de biodistribution ont montré que les cellules M, situées au niveau
des plaques de Peyer (chez la souris), permettent le passage des nanoparticules de la
lumière intestinale à la muqueuse intestinale. Nous souhaitons élargir cette étude en
analysant leur distribution dans le reste de l’organisme afin de mieux comprendre leur
prise en charge et tenter de l’améliorer à l’aide de molécules immunostimulatrices
appropriées.
Cette étude repose sur les propriétés du système GAL4/UAS qui se traduit par l’expression
de la protéine fluorescente GFP lorsque la protéine Gal4 se fixe sur le promoteur UAS. La
protéine Gal4 a été réduite au maximum afin d’él iminer toute association et réaction
aspécifique. Ainsi la protéine gal4min a été produite chez la bactérie BL21 (De3). Après
validation de la construction et de la fonctionnalité de la protéine recombinante, celle-ci a
été adsorbée sur des nanoparticules fluorescentes (Fluorophore Bodipy CellTrace). Des
larves UAS-GFP, au stade 1 ont été nourries avec ces formulations PLA-gal4min. Au Stade
3, il est possible de visualiser des cellules GFP positives au niveau de la muqueuse
intestinale. Ces observations valident ainsi le concept selon lequel les NPs PLA-gal4min
pourraient permettre de suivre la biodistribution des NPs chez la Drosophile. Ce concept
pouvant par la suite être étendu à d’autres modèles.
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