Le code-barres Rouge-Vert-Bleu (RVB) : Un modèle fluorescent de suivi du lignage cellulaire pour déchiffrer la fonction du récepteur nucléaire de l'hormone thyroïdienne TRα1 dans l'hétérogénéité et la hiérarchisation du cancer colorectal

Léo Claret (1, 2)

1 Equipe 3 : Développement, cancer et cellules souches - INSERM U1113
2 EPHE - École Pratique des Hautes Études

Nos études précédentes ont mis en évidence les rôles clés du récepteur nucléaire de l'hormone thyroïdienne TRα1 dans le contrôle de la biologie des cellules souches/progénitrices des cryptes intestinales. Les mécanismes impliqués incluent les régulations des voies WNT et NOTCH et ces mêmes régulations sont présentes dans les cancers colorectaux humains (CCR). Plus particulièrement, nous avons observé un patron d'expression de TRα1 très variable dans les CCR, en accord avec la grande hétérogénéité de ces tumeurs. Dans le but d'étudier les propriétés des populations cellulaires exprimant différents niveaux de TRα1, nous avons développé une approche de code-barres fluorescents et génétiques, un outil puissant pour générer aléatoirement des cellules traçables. Pour cela, nous avons utilisé l'approche LeGO qui permet d’exprimer des combinaisons de protéines fluorescentes mCherry (rouge), Venus (vert) et Cerulean (bleu) dans des sphéroïdes de cellules Caco-2/TC-7 et des tumoroïdes dérivés de patients. Ces modèles RVB permettent d’étudier la nature et le comportement des populations de cellules à code-barres. Pour valider le modèle, nous avons réalisé des expériences in vitro de sphéroïdes en culture et in vivo de sphéroïdes xénogreffés chez des souris immunodéprimées. Les sphéroïdes RVB avaient été générés en mélangeant un nombre égal de cellules Caco-2 exprimant différents niveaux de TRα1 pour analyser les propriétés de chaque clone et les corréler avec les caractéristiques tumorales. Les premiers résultats obtenus dans les deux modèles in vitro et in vivo, ont clairement montré une expansion du clone TRα1-Augmenté. Afin d'analyser le comportement des clones dans un modèle d'oncologie humaine plus intégré et pertinent, nous réalisons actuellement des expériences sur des tumoroïdes dérivés de patients à code-barres RVB, dans un contexte de niveaux endogènes mais naturellement hétérogènes de TRα1.

Mots clés: Hétérogénéité intra-tumorale; Lignage cellulaire; TH/TRa1; Cancer colorectal; Cellules souches cancéreuses; Organoïdes dérivés de tumeurs humaines.

Domaines: Sciences du Vivant [q-bio]

Léo Claret. Le code-barres Rouge-Vert-Bleu (RVB) : Un modèle fluorescent de suivi du lignage cellulaire pour déchiffrer la fonction du récepteur nucléaire de l'hormone thyroïdienne TRα1 dans l'hétérogénéité et la hiérarchisation du cancer colorectal. Sciences du Vivant [q-bio]. 2022. ⟨hal-03930614⟩