Etude du rôle de la protéine Dlg1 dans le cycle de réplication et la transmission du VIH-1
Résumé
La propagation du VIH-1 dans l’organisme est un processus dépendant du bourgeonnement de particules correctement assemblées. Pour ce faire, le virus utilise une stratégie de détournement de certaines protéines cellulaires, qui sont souvent des partenaires des protéines de structure virale Gag et Env. Le VIH-1 se transmet de deux façons dans un organisme : par particules libres ou par transfert de cellule à cellule via une structure appelée synapse virologique. Ce dernier moyen de propagation est considéré comme le plus efficace et prédominant in vitro. Nous avons précédemment identifié Dlg1, l’homologue humain de la protéine « Discs Large » de la drosophile, comme un nouveau partenaire de la protéine Gag du VIH-1. Dans ce contexte, nous avons étudié le rôle de Dlg1 dans les deux modes de transmission du VIH-1 dans des lymphocytes T, cellules cibles naturelles du virus, où l’extinction stable de Dlg1 est obtenue avec un vecteur shRNA. Nous avons montré que le virus se propage plus efficacement dans les cellules n’exprimant pas Dlg1. Des observations en microscopie confocale nous ont révélé que l’absence de Dlg1 n’empêchait pas la formation de la synapse virologique, et des analyses quantitatives nous ont montré que l’efficacité de la transmission de cellule-à-cellule du virus n’était également pas affectée. La meilleure efficacité de propagation en absence de Dlg1 résulte d’une augmentation significative de l’infectivité des particules relâchées. Ce phénotype des particules virales correspond à une augmentation de leur contenu en cholestérol qui permettrait d’augmenter l’efficacité de la fusion virus-cellule lors de l’étape d’entrée du virus. Nous avons donc montré que Dlg1 est un régulateur négatif de la transmission par particules libres du VIH-1, et que la transmission cellule-à-cellule du virus parvient à contourner cette régulation.
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